制藥真空冷凍干燥機(jī)在噬菌體的凍干保存,噬菌體原液中加入保存保護(hù)劑,以凍干粉形式保存,由于冷凍干燥在低溫下進(jìn)行,因此噬菌體不會(huì)發(fā)生變性或失 去生物活力,物質(zhì)中的一些揮發(fā)性成分損失很小,干燥在真空下進(jìn)行,氧氣極少,因此一些易氧化的物質(zhì)得到了保護(hù),并且噬菌體能保持原來的性狀,干燥后的凍干粉疏松多孔,呈海 綿狀,加溶媒后噬菌體可以溶解迅速而完全,幾乎立即恢復(fù)原來的性狀??梢栽谑覝乇4婊?者冷藏,對保存環(huán)境要求低,適應(yīng)性好,可以長期保存。
制藥真空冷凍干燥機(jī)在噬菌體凍干保存步驟工藝,主要如下:
1)噬菌體溶液于2-7℃靜置4-8h,出現(xiàn)絮狀沉淀,經(jīng)過8000-12000r/min離心20-40min;
2)向上述沉淀中加入噬菌體緩沖液,將沉淀溶解,得噬菌體液;
3)噬菌體液體積1-2.5倍的噬菌體保存保護(hù)劑混合均勻;
4)預(yù)降溫:將上述混合溶液冷凍降溫至5°C,并保持℃min;進(jìn)一步以1°C/min℃ 度降溫到-5°C,并保持℃min;再進(jìn)一步以rC/min的速度降溫到-30°C,并保持℃;
一級干燥:將上述溶液于-30°C、80-15℃T〇rr壓強(qiáng)的真空條件下干燥12-18h;
二級干燥:以0. rc/min的速度,加熱上述溶液到25°C,再于上述真空條℃保持 4-8h后得噬菌體凍干粉;
5)噬菌體凍干粉在無菌條件下密封于安瓿中保存。
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